利用CRISPR/Cas9建立RBBP4低表達(dá)的HepG2,LO2穩(wěn)定細(xì)胞系
摘要: 目的 利用CRISPR/Cas9在肝癌細(xì)胞HepG2及正常肝組織細(xì)胞(LO2)中敲低RBBP4 eGFP報(bào)告基因,構(gòu)建RBBP4低表達(dá)的HepG2及LO2穩(wěn)定細(xì)胞系。方法 基于CRISPR/Cas9系統(tǒng)原理,設(shè)計(jì)靶向細(xì)胞RBBP4基因第1個(gè)外顯子的小向?qū)NA(sgRNA),構(gòu)建具有左右同源臂和P2A-eGFP供體質(zhì)粒的干擾質(zhì)粒;將測序鑒定正確的重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染至HepG2及L... ...
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