鳶尾素在大腸桿菌中的重組表達(dá)及純化
摘要: 目的 在大腸桿菌中重組表達(dá)并純化得到高產(chǎn)量、高純度的鳶尾素(Irisin)重組蛋白,為后續(xù)Irisin的功能研究奠定基礎(chǔ)。方法 對(duì)Irisin基因CDS序列密碼子優(yōu)化后進(jìn)行基因合成,通過(guò)一步克隆連接法構(gòu)建重組質(zhì)粒pET-30a-Irisin,將其轉(zhuǎn)化到大腸桿菌表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞Rosetta(DE3)中。以終濃度為0.5 mM的IPTG在15℃、100rpm誘導(dǎo)表達(dá)30 h。誘導(dǎo)表... ...
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