基于CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)的EGFP基因定點(diǎn)整合表達(dá)
摘要: 目的:利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù),實(shí)現(xiàn)EGFP基因在CHO細(xì)胞ACTB基因座位置定點(diǎn)整合和表達(dá),建立基于CRISPR/Cas9技術(shù)的外源基因定點(diǎn)整合和表達(dá)技術(shù)。方法:根據(jù)CHO細(xì)胞β-actin(ACTB)基因起始密碼子區(qū)基因序列,設(shè)計(jì)相應(yīng)CRISPR/Cas9系統(tǒng),同時(shí)構(gòu)建含有ACTB同源臂和EGFP基因的同源供體載體(donor vector),通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法... ...
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