基于Cre-LoxP系統(tǒng)的條件性定點(diǎn)敲入人源hRas基因小鼠的建立
摘要: 目的構(gòu)建基于Cre-LoxP系統(tǒng)的條件性定點(diǎn)敲入人源hRas基因(c-Ha-ras)的小鼠,以獲得hRas基因在特定組織器官條件性表達(dá)的小鼠模型,用于藥物的臨床前致癌性安全評(píng)價(jià)及相關(guān)機(jī)制研究。方法首先構(gòu)建hRas打靶載體,電擊法轉(zhuǎn)染入小鼠胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞),用正負(fù)法篩選陽性ES細(xì)胞,通過PCR、Southern鑒定后,將正確重組hRas基因的ES細(xì)胞導(dǎo)入C57BL/6 J小... ...
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