基因編輯與診斷工具酶LwCas13a的克隆表達(dá)、純化與酶活性鑒定

摘要： 目的 開發(fā)可大量制備具有天然酶活性的基因編輯與診斷工具酶LwCas13a的技術(shù)，為研究基因編輯或開發(fā)基因診斷試劑提供穩(wěn)定的酶。方法 以Lw Cas13a蛋白基因序列為模板，采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因Lw Cas13a，運(yùn)用NotⅠ和BamHⅠ進(jìn)行雙酶切，將酶切產(chǎn)物與相同酶切獲得的載體pC013用T4 DNA連接酶連接構(gòu)建成含有融合表達(dá)His標(biāo)簽的原核表達(dá)載體pC013-Twin... ... （共6頁）