敲除SOSSB1、SOSSB2和SOSSC基因穩(wěn)定HeLa細胞株的構建

摘要： 目的構建SOSSB1、SOSSB2和SOSSC基因敲除的穩(wěn)定HeLa細胞株。方法分別設計并合成SOSSB1、SOSSB2和SOSSC亞基的兩對靶向基因特定外顯子的A、B兩個單導向核酸(single guide RNA,sgRNA)及其互補鏈,與含BbsⅠ黏性末端的PX462載體連接,構建重組質粒。重組質粒經(jīng)酶切和測序鑒定正確后,分別轉染至HeLa細胞,用2μg/mL的嘌呤霉素培... ... （共5頁）