Red/ET同源重組介導(dǎo)的基因克隆載體pBACS的構(gòu)建、鑒定與應(yīng)用

摘要： 目的 通過Red/ET同源重組技術(shù)構(gòu)建pBACS基因克隆及測序質(zhì)粒載體。方法 以質(zhì)粒pBAC2015、pET28a為模板設(shè)計四對引物，PCR擴(kuò)增得到四段彼此間有50 bp同源區(qū)域的基因片段，分別命名為bac-sop、bac-ori、bac-kan和bac-T7。利用Red/ET同源重組技術(shù)，將四段基因片段電轉(zhuǎn)至E.coli GB05-dir感受態(tài)中進(jìn)行線線重組。經(jīng)酶切、測序驗證... ... （共8頁）