透骨消痛膠囊抑制脂多糖誘導軟骨細胞炎癥反應的機制研究

摘要： 目的探討透骨消痛膠囊抑制脂多糖(LPS)誘導的軟骨細胞炎癥反應作用機制。方法對4周齡雄性SD大鼠采用機械-Ⅱ型膠原酶消化法獲取膝關節(jié)軟骨細胞并進行體外培養(yǎng),將軟骨細胞分為空白組、模型組以及透骨消痛膠囊組,空白組加入含10%胎牛血清(FBS)的低糖型Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基(DMEM/LOW)2mL,模型組加入含10ng/mLLPS、10%FBS的DMEM/LOW培養(yǎng)基2mL,透骨消痛膠囊組加入含10ng/mLLPS、透骨消痛膠囊(300μg/mL)、10%FBS的DMEM/LOW培養(yǎng)基2mL。干預8h后,實時熒光定量聚合酶鏈式反應(qPCR)檢測各組微小RNA(miRNA)-140表達變化,免疫熒光觀察各組帶有血小板凝血酶敏感蛋白樣模體的解整鏈蛋白金屬蛋白酶(ADAMTS)4、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-3表達變化,ImageJ分析各組平均光密度。結果與空白組相比,模型組MMP-3表達升高(P<0.05)、ADAMTS4表達明顯升高(P<0.01);與模型組相比,透骨消痛膠囊組MMP-3表達下降(P<0.05)、ADAMTS4表達明顯下降(P<0.01)。與空白組相比,模型組軟骨細胞miRNA-140表達明顯降低(P<0.05);與模型組相比,透骨消痛膠囊組軟骨細胞miRNA表達明顯升高(P<0.05)。結論透骨消痛膠囊能促進miRNA-140表達,降低ADAMTS4、MMP-3分泌,抑制炎癥反應介導的軟骨基質(zhì)降解,從而延緩骨關節(jié)炎軟骨退變。 ... （共5頁）