透骨消痛膠囊及其拆方對(duì)退變軟骨細(xì)胞Wnt/β-catenin信號(hào)通路的影響

摘要： 背景:前期研究表明,透骨消痛膠囊能調(diào)控軟骨細(xì)胞Rho/Rock信號(hào)通路、抑制軟骨細(xì)胞線粒體凋亡通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、改變軟骨下骨重塑的速率和模式、改善軟骨下骨膠原纖維和鈣磷結(jié)晶的排列等對(duì)骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)揮治療作用。目的:進(jìn)一步觀察透骨消痛膠囊及其拆方含藥血清對(duì)大鼠退變軟骨細(xì)胞Wnt/β-catenin信號(hào)通路的影響,揭示方中治療骨性關(guān)節(jié)炎的主要治法。方法:(1)取SD大鼠40只隨機(jī)分為透骨消痛膠囊組、補(bǔ)腎柔肝組、活血祛風(fēng)組和生理鹽水組,按照藥理試驗(yàn)中動(dòng)物間和動(dòng)物與人體間的等效劑量換算,前3組分別灌服等效劑量的透骨消痛膠囊、補(bǔ)腎柔肝藥、活血祛風(fēng)藥,生理鹽水組灌服生理鹽水,制備含藥血清用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。(2)體外培養(yǎng)SD大鼠軟骨細(xì)胞并分為5組:空白對(duì)照組、模型組、透骨消痛膠囊組、補(bǔ)腎柔肝組和活血祛風(fēng)組。模型組及各給藥組用白細(xì)胞介素1β干預(yù)軟骨細(xì)胞24h后,加入各組血清干預(yù)軟骨細(xì)胞72h,空白對(duì)照組用鹽水血清培養(yǎng),同一時(shí)間收集空白對(duì)照組軟骨細(xì)胞。(3)采用實(shí)時(shí)定量反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)和Westernblot法分析Wnt4、β-catenin、基質(zhì)金屬蛋白酶13的表達(dá)。結(jié)果與結(jié)論:(1)與空白對(duì)照組相比,模型組Wnt4、β-catenin、基質(zhì)金屬蛋白酶13表達(dá)均明顯增加。(2)與模型組相比,透骨消痛膠囊組、補(bǔ)腎柔肝組和活血祛風(fēng)組的Wnt4、β-catenin、基質(zhì)金屬蛋白酶13表達(dá)均明顯降低,且降低程度為透骨消痛膠囊組>補(bǔ)腎柔肝組>活血祛風(fēng)組。(3)結(jié)果提示透骨消痛膠囊對(duì)白細(xì)胞介素1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞具有協(xié)同保護(hù)作用,補(bǔ)腎柔肝為透骨消痛膠囊治療骨性關(guān)節(jié)炎的主要治法。 ... （共6頁(yè)）