蛞蝓提取物抗肺癌的作用機(jī)制研究

摘要： 目的探討蛞蝓提取物(EL-3)抗肺癌的作用機(jī)制。方法 (1)溴化尿嘧啶核苷(BrdU)摻入法觀察EL-3對人源性肺癌A549細(xì)胞的摻入抑制率;(2)吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色熒光顯微鏡,觀察EL-3誘發(fā)A549凋亡細(xì)胞的形態(tài),計數(shù)凋亡細(xì)胞;PI染色流式細(xì)胞術(shù)(FCM)分析細(xì)胞周期和凋亡率。(3)DNA瓊脂糖凝膠電泳法,觀察凋亡細(xì)胞"梯形"DNA條帶;(4)免疫組化DAB染色法觀察EL-3對PCNA、VEGF、CD31的蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果 (1)單用蛞蝓提取物100μg/mL濃度的EL-3對人肺癌細(xì)胞A549核酸合成抑制率(IR)高達(dá)63.59%;與空白對照組(0)和溶媒對照組(7.54%)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),且呈劑量依賴性,其半數(shù)抑制濃度為28.53μg/mL;(2)與化療藥合用有增效作用:EL-3與順鉑合用能顯著提高順鉑對A549細(xì)胞的核酸合成抑制率:EL-3低、中、高劑量組,使單用DDP的IR由14.01%分別提高到44.5%、48.96%和67.05%(P<0.01);IC50為20.62μg/mL;EL-3與紫杉醇合用能顯著提高紫杉醇對A549細(xì)胞的核酸合成抑制率。EL-3低、中、高劑量組使單用TAX對A549細(xì)胞的IR由21.79%,分別提高到58.35%、66.13%和73.67%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),IC50值為7.41μg/mL;(3)EL-3能有效地誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡;(4)EL-3具有抑制裸鼠移植瘤細(xì)胞PCNA和VEGF及CD31蛋白表達(dá)作用。結(jié)論 EL-3抗肺癌的作用機(jī)制是多靶點復(fù)合性的有:(1)抑制肺癌細(xì)胞核酸合成;(2)誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞凋亡;(3)抑制癌灶的血管生成和癌細(xì)胞對血管壁的黏附。 ... （共6頁）