樟子松SSR反應體系優(yōu)化

摘要： 從模板DNA、Taq酶含量、dNTP濃度、引物濃度、退火溫度、循環(huán)次數(shù)6個方面,分別設置單因素多水平試驗,觀察條帶的亮度及清晰度,以確定合適的反應體系。然后利用L16(45)正交試驗,對DNA模板濃度、Taq酶含量、dNTP濃度、引物濃度這4個因素在4個水平上做進一步優(yōu)化。建立了樟子松SSR最佳反應體系:25μL的反應體系中包含模板DNA50ng,Taq酶1.0U,dNTP0.3mmol/L,引物0.15μmol/L,10×TaqBuffer(含Mg2+)2.5μL。樟子松SSR反應體系的優(yōu)化,有助于對樟子松SSR分子標記的研究,為分析樟子松天然群體和人工群體的遺傳結(jié)構(gòu)多樣性,構(gòu)建遺傳圖譜和定位功能基因奠定了基礎。 （共7頁）