分光光度法快速檢測細(xì)菌

摘要： 采用分光光度法來檢測完整細(xì)胞內(nèi)H2O2酶的活性,以實(shí)現(xiàn)細(xì)菌的快速檢測。由于細(xì)菌(本研究以E.coli DH5α為模型)內(nèi)含有H2O2酶,當(dāng)往菌液中加入H2O2時(shí),H2O2會在胞內(nèi)H2O2酶的作用下分解,其分解過程遵循一級動力學(xué)反應(yīng)。通過測量該反應(yīng)中H2O2在240nm處吸光度的變化,可以得出該一級反應(yīng)的速率常數(shù),從而獲悉菌液的濃度。結(jié)果表明:大腸桿菌單位細(xì)胞濃度酶活為4.2×10-13L/(s·cell),其速率常數(shù)與濃度在5.7×106～5.7×107cfu/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,檢出限為5.7×106cfu/mL。本方法是一種檢測細(xì)菌總數(shù)的快速方法,測試時(shí)間為5～10min。 （共4頁）